ПЦР – часто применяемый в венерологии и инфектологии метод выявления различных патологий.
Биоматериалом для исследований может служить любая биологическая жидкость. Многие инфекции могут быть выявлены в крови, если их ДНК попадает в системный кровоток. С помощью анализа крови на РНК или ДНК микроорганизмов можно выявить множество различных инфекций.
Таким способом диагностируют в основном:
- вирусные инфекции
- бактериальные инфекции в случае их генерализации
Реже ПЦР делают на грибки или паразиты. В большинстве случаев в крови определяются вирусы. Потому что другие группы микроорганизмов чаще создают локальные очаги воспаления. Но иногда происходит генерализация процесса.
Бактерии могут проникать в кровь, разноситься по организму. В этом случае проводится анализ крови методом ПЦР с целью их выявления.
Диагностика крови методом ПЦР бывает количественной и качественной. Иногда также проводятся полуколичественные тесты. При стандартном исследовании подтверждается или опровергается сам факт присутствия патогена в организме. Количественный метод используют для оценки уровня вирусной или бактериальной нагрузки. Полуколичественный способ используют для инфекций, которые иногда опасны, но в большинстве случаев не вызывают воспаления. Например, есть определенная концентрация, за границей которой есть риск патологии.
Тогда результатов может быть три:
- ДНК не обнаружено
- ДНК выявлено, но концентрация в пределах допустимой
- ДНК обнаружено в высокой концентрации, достаточной для развития воспаления
При этом сами цифры, сколько именно копий ДНК содержит кровь в 1 мл, не указывают. Молекулярная диагностика методом ПЦР и дает возможность определить инфекции даже при небольшой концентрации возбудителей. Потому что данный диагностический тест обладает высокой чувствительностью.
У него также высокая специфичность. Ложноположительные результаты встречаются редко.
ПЦР крови на герпес
Этот анализ делают редко.
В основном ДНК вируса выявляют в биоматериале, полученном из поверхности высыпаний. Но анализ крови тоже делают. В ней могут быть обнаружены специфические участки ДНК.
Есть исследования с типированием или без него.
Часто анализ проводят сразу на 1 и 2 тип герпеса. При этом выявляется характерный для обоих типов фрагмент ДНК. То есть, он присутствует и у одного вируса, и у другого. Поэтому при положительном результате нельзя понять, каким типом заражен человек.
Часто это не имеет значения для определения терапевтической тактики. Потому что разные типы герпеса подавляются одними и теми же препаратами. Но есть значение для оценки прогноза заболевания.
Герпес 2 типа чаще рецидивирует. Соответственно, таким пациентам чаще назначается супрессивная терапия, направленная на снижение частоты обострений инфекции. Если возникает необходимость определения типа вируса герпеса, проводится ПЦР с типированием. В этом случае мишенью для выявления служат участки ДНК, характерные для одного либо другого вируса.
В результатах выдается не только «выявлено» или «не выявлено». Указывается и тип вируса простого герпеса.
Анализ ПЦР на герпес зостер
Варицелла зостер – это возбудитель ветрянки и опоясывающего лишая.
Данный вирус входит в семейство герпеса. При анализе крови с помощью ПЦР можно обнаружить его ДНК.
Проводится диагностика:
- перед беременностью
- при появлении симптомов опоясывающего лишая или ветрянки
- для дифференциальной диагностики этих заболеваний с энтеровирусными инфекциями или простым герпесом
Хотя герпес зостер может долгое время пребывать в организме в случае перенесенной ветрянки, инфекция протекает в латентной форме.
Вирус «прячется» в нервных ганглиях.
Потому его ДНК в крови не определяется.
ПЦР даст позитивный результат, только если есть симптомы инфекции. Поэтому, если симптомы появились, а ДНК варицеллы зостер в крови нет, это означает, что болезнь вызвана другим возбудителем.
Анализ ПЦР на туберкулез
Кровь на туберкулез сдают из локтевой вены. Это требуется для обнаружения ДНК микобактерий в системном кровотоке. Исследование делают для того, чтобы дифференцировать ограниченные и генерализованные формы туберкулеза.
Показания, при которых врачи могут назначить этот анализ:
- лихорадка с постоянными повышениями и понижениями температуры тела на фоне положительной туберкулиновой пробы
- острое воспаление респираторных органов при наличии в анамнезе контакта с больным туберкулезом
- дифференциальная диагностика ложноположительных результатов туберкулиновой пробы
- рентгенологические признаки туберкулеза
Кроме того, женщины сдают менструальную кровь для выявления туберкулезного поражения репродуктивных органов.
Показания:
- воспалительный процесс эндометрия
- гистерографические признаки туберкулеза
- бесплодие при исключении другой патологии
Результат выдается «обнаружено» или «не обнаружено». Выявление микобактерий – показание к назначению лечения.
Анализ крови на стафилококковую инфекцию методом ПЦР
Стафилококки являются условно-патогенными микроорганизмами. Это часть нормальной микрофлоры человека.
Бактерии живут на коже, в носу и мочеполовых органах.
Но иногда стафилококки способны вызывать тяжелые патологии.
При подозрении на генерализацию инфекции назначают ПЦР крови на стафилококк. Небольшое количество этих бактерий может присутствовать в крови в норме. Поэтому положительный результат выдается при их присутствии более чем 10 в 4 степени копий ДНК в мл крови. Это говорит о высокой вероятности заболеваний, таких как сепсис, менингит, пневмония стафилококковой этиологии.
С током крови бактерии могут попадать в различные органы. Установление этиологического фактора воспалительных процессов помогает подобрать более эффективное лечение.
Анализы ПЦР на паразитов
На глисты ПЦР крови не делают.
Для диагностики используют ИФА – определяют уровень иммуноглобулинов в крови. А также исследуют материал, который взят непосредственно из очага поражения.
Паразитами также считаются одноклеточные простейшие микроорганизмы. Это трихомонада и токсоплазма.
На трихомонаду ПЦР делают. Но исследуют на кровь, а мазок из урогенитального тракта, мочу или эякулят.
А вот на токсоплазму делают и анализ крови методом ПЦР. Этот патоген опасен для беременных. Поэтому часто анализы проводят как скрининг при подготовке к зачатию.
Основные показания к проведению ПЦР на токсоплазмы:
- ВИЧ
- планирование беременности
- лимфаденопатия неустановленной этиологии
- увеличение печени и селезенки
- миозиты, энцефалиты, лихорадка непонятного происхождения
Специфичность теста ПЦР очень высокая – она достигает 98%. Паразиты выявляются в крови даже в малых количествах.
ПЦР на гепатит B количественный
Часто выполняется анализ крови методом ПЦР на гепатиты, которые передаются половым и парентеральным путем.
Хотя основными методами диагностики остаются серологические исследования крови. Диагноз обычно подтверждается путем определения антигенов и антител.
Тем не менее, ПЦР дает возможность:
- выявить скрытую инфекцию
- определить мутантные штаммы вируса гепатита B, при которых не обнаруживаются другие маркёры этого заболевания
ПЦР крови позволяет обнаружить ДНК вируса даже в инкубационный период.
В период ранней и поздней реконвалесценции генетический материал возбудителя исчезает из крови. Поэтому метод может применяться для подтверждения излеченности. Анализы проводят не только качественные, но и количественные.
Они позволяют оценивать:
- вирусную нагрузку
- риск перехода болезни в хроническую форму
- риск тяжелого течения патологии
- течение инфекции
- динамику излечения (по уменьшению вирусной нагрузки)
С помощью количественного теста можно установить, какой вирус является главным виновником поражения печени. Ведь у одного пациента их может быть сразу несколько.
Часто ПЦР используют для обследования контактных лиц. Потому что это самый ранний маркёр вирусного гепатита В. Метод также позволяет обнаружить репликацию вирусов при хроническом течении заболевания ещё до появления клинических симптомов.
Введение в клиническую практику ПЦР позволило:
- эффективно выявлять больных с низкой виремией
- устанавливать взаимосвязь между вирусной нагрузкой и неблагоприятными исходами патологии
Стабильно высокая вирусная нагрузка – основание для противовирусной терапии.
Анализ крови на ПЦР гепатит C количественный
Исследование применяют для:
- раннего обнаружения вируса гепатита С (РНК патогена выявляется в крови уже спустя 10-14 дней после инфицирования, в то время как антител ещё нет)
- тестирования донорской крови
- подтверждения излеченности (при выздоровлении РНК вируса больше не определяется в крови, в то время как антитела продолжают обнаруживаться ещё некоторое время)
ПЦР – более достоверный тест, чем анализ на антитела, который дает до 20% ложноположительных результатов. Метод дает возможность идентифицировать разные типы вируса.
В свою очередь это позволяет оценить прогноз заболевания и подобрать терапевтическую тактику. Кроме того, может использоваться анализ крови ПЦР количественный. Его назначают для оценки уровня вирусной нагрузки.
Исходная вирусная нагрузка оценивается для определения показаний к началу терапии. Она влияет на выбор схемы лечения.
В последующем анализ делают для оценки результативности терапии. Расшифровка анализа крови ПЦР на гепатит С дает возможность установить оптимальные дозы препаратов и сроки лечения.
Анализ крови ПЦР на ВИЧ
Основным исследованием для первичной диагностики ВИЧ-инфекции остается анализ крови на антитела.
ПЦР применяется в ограниченном количестве случаев. Это исследование необходимо для подтверждения диагноза при слабоположительном результате крови на антитела.
ПЦР также проводится для первичной диагностики ВИЧ у новорожденных. Потому что наличие у них антител ни о чем не говорит.
Ведь долгое время после рождения в крови детей циркулируют материнские антитела. Таким образом, серологические тесты не позволяют врачу узнать, вырабатывает организм малыша собственные иммуноглобулины или нет. В то же время ПЦР позволяет определить вирусную РНК.
Поэтому позитивный результат теста свидетельствует о том, что ребенок болен ВИЧ.
ПЦР сдают при наличии подозрения на острую инфекцию. То есть, когда человек только недавно заразился, и у него проявился гриппоподобный синдром. В этом случае серологические анализы крови могут ещё не дать положительные результаты. Ведь с момента заражения прошло слишком мало времени.
ПЦР дает положительные результаты гораздо раньше других тестов, даже в ранние периоды инфекции. Поэтому именно этот метод используется в острой фазе заболевания.
ПЦР применяется для оценки качества донорской крови. Тем не менее, для первичной диагностики ПЦР применяется не вместо серологических тестов, а в дополнение к ним.
Причин тому несколько:
1. ПЦР не выявляет ВИЧ 2 типа, который составляет около 0,5% случаев
2. Возможны мутации ВИЧ, и в этом случае искомый фрагмент РНК может быть не найден Проблему решает проведение ПЦР с двойной мишенью. В этом случае определяется не один, 2 фрагмента генетического кода.
3. Организм некоторых пациентов сдерживает развитие ВИЧ. Вирусная нагрузка у них ниже определяемой. То есть, ПЦР дает отрицательный результат. При этом антитела в крови присутствуют. Таких пациентов около 1% от общего числа инфицированных.
ПЦР на ВИЧ количественный
Количественное исследование применяется не для выявления, а для мониторинга инфекции. Это исследование определяет показания к лечению и оценивает его результаты.
Виремия обозначается в количестве копий в мкл. Нагрузка ниже 10 тысяч копий считается низкой.
Если она превышает 100 тысяч копий, то её называют высокой. Эти границы весьма условны. Потому что даже у одного пациента в разных образцах крови возможны колебания значений вирусной нагрузки. Показателем успешности лечения ВИЧ и её целью является неопределяемая вирусная нагрузка.
У каждого теста ПЦР есть граница чувствительности. Это количество копий генетического материала вируса, при котором они передают определяться в крови. Обычно это 50 копий в мкл.
Если уровень вирусной нагрузки ниже, она считается неопределяемой. Это благоприятный прогностический знак.
Он говорит о том, что:
1. Антиретровирусная терапия работает. К препаратам ещё не выработалась резистентность. Поэтому в замене препаратов и коррекции схемы лечения нет необходимости.
2. Уровень СД4 лимфоцитов не будет уменьшаться. То есть, иммунитет человека не страдает. Поэтому в ближайшее время ожидать оппортунистических инфекций нет оснований.
У некоторых пациентов наблюдаются всплески вирусной нагрузки. Это значит, что иногда анализ крови на ВИЧ методом ПЦР показывает положительный результат.
Но при этом вирусная нагрузка минимальная. Она обычно не превышает 200 копий в мкл. Это не говорит о том, что терапия стала неэффективной. Со временем вирусная нагрузка снова может снизиться до неопределяемого уровня.
Благодаря определению вирусной нагрузки анализ крови методом ПЦР позволяет:
- определить стадию инфекционного процесса
- дать прогноз развитию заболевания
- оценить заразность человека
- определить показания к назначению антиретровирусной терапии
- оценить её эффективность
- определить момент, когда стоит ввести другие препараты для терапии
Где сдают анализы ПЦР
Если вам нужно исследовать кровь методом ПЦР, обращайтесь в нашу клинику.
Мы предлагаем:
- аккуратный забор биоматериала
- соблюдение всех правил, позволяющих избежать загрязнения крови в пробирке (это может привести к ложноположительным результатам)
- дополнительные методы диагностики инфекций
- расшифровку анализов
- при положительном результате – лечение инфекционных заболеваний
В нашей клинике работают опытные врачи.
Анализы ПЦР крови на гепатиты С и В, ВИЧ и другие патологии можно сдать по доступным ценам.
Если вам необходимо сдать анализы крови методом ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.